Es un medio altamente enriquecido qua permita al crecimiento de la mayoría de bacterias.

 

Peptona                                         10.0g

Extracto de carne                            3.0 g

Cloruro de sodio                             5.0 g 

Agua destilada                         1000.0 ml 

 

Disolver los ingredientes al Baño María, enfriar y ajustar el pH a 7.2.

Repartir en tubos (10 ml/tubo) ó en balones de volumen necesitado conteniendo el volúmen requerido para al trabajo de laboratorio. Autoclavar a 121°C por 15 min.

 

Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.

Es una agua peptonada que permite, mediante la adición de un reactivo específico, comprobar la reacción del indol.

 

Peptona                                         20.0g

ClNa                                               5.0g

Agua destilada                          1000.0ml

 

Se disuelve la peptona y el NaCl.

Cuando está a 50°C, se controla el ph a 7.0.

Se autoclava a 121°C x 15 min.

Se reparte 2ml por cada tubo de 10 x 100.

 

Se siembra la colonia por identificarse a partir del medio TSI o directamente del medio de aislamiento. Incubar por 24 horas a 37°C.

Luego de la incubación, agregar 3 ó 4 gotas del reactivo de kovacs, preparado de la siguiente manera:

Alcohol amílico o isoamílico              75ml

Ácido clorhídrico                              25ml

Para-dimetil-amino-benzaldehido          5g

El reactivo debe ser preparado por lo menos 48horas antes y ser mantenido a 4°C.

 

La degradación del aminoácido triptofano contenido en la peptona,mediante una enzima produce un compuesto heterocíclico el indol, el cual en presencia del para-dimetil-amino-benzaldehido, en medio ácido produce un compuesto  complejo coloreado,soluble en solvente orgánico, especialmente en el alcohol amílico, entonces se produce un anillo de color cereza y el microrganismo es Indol positivo. El complejo del triptófano con el p-DAR no es absorvible por el alcohol amílico.

En algunas circunstancias se suelen preparar el caldo úrea y el caldo INDOL en un mismo tubo. En este caso,se disuelven la peptona (del caldo peptonado) y los ingredientes del caldo úrea (excepto la úrea) en el B.M. y cuando el medio está a 50°C se agrega la úrea. Otras veces se agrega los ingredientes del caldo úrea sobre el agua peptonada estéril, cuando ésta 50°C y se esterlliza por filtración. Es un medio preparado asi, la lectura de úrea precede a la adición del reactivo KOVACS para el indol.

Es necesario recordar que para la úrea positiva el PH del medio es alcalino , y el rojo fenol vira al color cereza; mientras que para el indol el pH del medio es fuertemente ácido, por el HCL contenido en el reactivo KOVACS.

Por lo tanto una reacción es independiente de la otra, es decir, en el tubo  puede leerse úrea positiva o indol positivo, o úrea negativa o indol positivo o viceversa, indistintamente.

Son úrea positivos: los Proteus.

Son úrea negativos: Shiguella, Escherichia, Salmonella, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella , Serratia, Providencia.

 

Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.

Para enriquecimiento, aislamiento, cultivo y diferenciación, sobre todo de brucellas, pero también de Estreptococcos, Pneumococcos, Meningococos, Listerias, Pasteurellas y otros microorganismos patógenos.

Aislamientos de razas de brucellas a partir de cultivos mixtos: La adición de violeta cristal sirve para la inhibición de la flora gram positiva.

Diferenciación de las especies de Brucella, en base a su sensibilidad frente a determinados colorantes: Adición de tionina y fuscina básica.

Este medio de cultivo constituye una buena base para la preparación de agar-agar. Investigación de brucella melitensis en hemocultivos: Adición de sodio citrato, como anticoagulante; la adición de agar-agar y el cultivo en atmósfera con 10% de CO2 aumentan el rendimiento en Brucellas.

 

Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.

Es el caldo Nutritivo pero adicionado de Agar-agar. El medio sólido permite estudiar la morfología de las colonias.

 

Peptona                                        10.0 g

Agar                                              16.0g

Cloruro de sodio                               5.0g

Agua destilada                         1000.0 ml

Extracto de carne                             3.0g

 

Disolver los ingredientes al Baño María.

Controlar el pH a 7.2.

Autoclavar a 121°C por 15 minutos.

Repartir   en placas Petri, 22 ml por placa.

 

Sembrar siguiendo el método de las estrías.

Incubar a 37°C por 24 horas.

 

Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.

Es un medio altamente enriquecido que permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos difíciles de cultivar.

Peptona                                           6.0g

Casitona                                          4.0g

Extracto de levadura                         3.0g

Extracto de carne                              1.5g

Dextrosa                                          1.0g

Agar-agar                                       18.0g

Agua destilada                           1000.0ml

 

Disolver los ingredientes con ayuda del calor.

Controlar el pH a 7.0 y autoclavar a 121°C por 15 min.

Repartir en placa de Petri estériles.

 

Sembrar siguiendo cualquiera de los métodos ya conocidos.

 

Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.