Medio de Gelatina

Ciertas bacterias elaboran una enzima extracelular que tiene la propiedad de hidrolizar la gelatina, esta enzima es conocida como Gelatinasa. La presencia de gelatinasa puede ser demostrada inoculando un cultivo bacteriano en un medio conteniendo gelatina.

La prueba se realiza a temperatura a la cual la gelatina se mantenga en estado sólido por si misma (por ejemplo a 37°C de temperatura)

 

Peptona                      5.0 g     

Gelatina                  120.0 g

Extracto de carne         3.0 g     

Agua destilada·      1000.0 ml

 

Disolver los ingredientes, controlar el PH a 7.0 y se reparten en tubos de 13x130, 15ml por tubo. Autoclavar a 115°C por 30 min. Los tubos deben solidificar en posición vertical. Comprobar la solidificación de la gelatina poniendo, si fuera necesario en la heladera a 4°C.

 

Inocular los tubos en profundidad e incubar a 37°C durante 24 hrs., Incubar tubos sin inocular para el control.

 

La presencia de líquido significa que la gelatina ha sido hidrolizada (liquefactada). Por el contrario, si el medio permanece sólido es señal de que la bacteria no posee la enzima gelatinasa. Este medio puede ser repartido en placas, 20ml por placa y sembrado en estrías, luego de la incubación se agrega el siguiente reactivo:

 

REACTIVO DE FRAZIER

  HgCL2                  15 g

  Agua destilada     100 ml

  HCl(c)                 20 ml .

 

Se cubre la placa con el reactivo, cuando la gelatina no es hidrolizada, se formará un precipitado blanco muy opaco ( ausencia de hidrólisis ), y cuando la gelatina es hidrolizada se formará un halo claro en el contorno de la colonia sobre la estría.

 

Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.