PRINCIPIOS GENERALES
• La brucelosis es una enfermedad infecciosa, bacteriana, que afecta principalmente a los bovinos, caprinos porcinos y equinos. Es una enfermedad zoonótica de importancia mundial por afectar al hombre en ciertas circunstancias especiales.
• La Brucella es un microorganismo cocobacilar, no móvil, no esporulado, gran negativo de 0,5 x 1,5 um. Puede agruparse en pares o en cadenas cortas. Existen tres espeeies principales del género Brucella: Brucella abortus, Brucella suis, Brucella melitensis, siendo esta última la que produce mayor severidad clínica en el hombre.
• El diagnóstico microbiológico de brucelosis se basa en la demostración de la presencia de brucelas en el organismo y/o en la presencia de los anticuerpos anti-Brucella con títulos demostrativos en la sangre y, ocasionalmente, en otros líquidos como el líquido cefalorraquídeo, exudados, etc.
• Puesto que no se consigue siempre el aislamiento de la brucela, es obligatorio recurrir para el diagnóstico al empleo de métodos serológicos.
 * Si tomamos en consideración la estructura antigénica del género Brucella y la respuesta inmune del paciente, las pruebas serológicas se pueden agrupar según  el antígeno o la clase de inmunoglobulina (IgM o IgG) que interviene en la reacción.
• Las pruebas que se usan en el diagnóstico serológico de brucelosis son:
 - Prueba de aglutinación en placa.
 - Prueba de aglutinación en tubo.
 - Prueba de 2-Mercaptoetanol.
 - Rosa de Bengala.
 - Anticuerpos bloqueadores y el fenómeno de zona que se observa en prueba en tubo.
Atención:
*Tanto los antígenos como los sueros deben estar a temperatura ambiente por lo menos una hora antes de realizar la prueba.
*Los antígenos para diagnóstico deben mantenerse en refrigeración a una temperatura de 4 - 8°C. Se debe evitar su congelación, porque quedan inutilizados definitivamente.
 
MATERIALES SEROLOGÍA DE BRUCELOSIS
 - Aglutinoscopio.
 - Placa o lámina de vidrio dividida en 72 cuadrados de 3,0 a 3,5 cm por lado.
 - Pipetas graduadas para medir: 0,08, 0,04, 0,02, 0,01, 0,005 ml (puede  usarse pipetas de 0,2 ml graduadas al milésimo o al centésimo).
 - Gotero calibrado que dé exactamente 0,03 ml por gota.
 - Agitadores de metal, de plástico o palitos de dientes. 
 - Un cronómetro.
 - Sueros control positivo y negativo.
 - Tubos de ensayo 13 x 100 mm.
 - Pipetas serológicas de 10 y 5 ml.
 - Jeringas de 2 ml de capacidad con aguja N° 16 y 21/2 pulgadas de longitud.
 - Micropipetas de 5 - 50 ul, de 20 - 200 ul y otra de 200 - 1 000 ul de rango.
 
METODOS SEROLÓGICOS
CONTROL DE CALIDAD DE LAS PRUEBAS
• Uno de los mayores problemas que existe en el diagnóstico serológico es la calidad de los antígenos que se usan en la prueba.
• En el control de antígenos de Brucella se debe tener en cuenta los siguientes datos:
DATOS GENERALES
• Anotar en una ficha:
- El laboratorio productor del antígeno.
- El tipo de antígeno.
- La cepa utilizada.
- La fecha de expiración.
- El volumen de antígeno por frasco.
- Número de frascos y si viene con gotero o no.
ASPECTO DEL ANTÍGENO
• Anotar el color del antígeno comparándolo con el antígeno de referencia, si se tiene presencia de grumos o si cuando se deja reposar el antígeno se depositan impurezas en el fondo del frasco.
PUREZA
* Hacer una coloración de Gram debiendo observarse sólo la presencia de cocobacilos gramnegativos.
ESTERILIDAD 
• Sembrar una gota del antígeno en :
- Un tubo de agar tripticase soya.
- Un tubo de caldo dextrosado con indicador de Andrade.
- Un tubo con agar Saboraoud.
• Observar por 7 días. No deben crecer gérmenes en ninguno de los medios.
CONTROL DE pH
• Medir el pH, tanto del antígeno de prueba como del antígeno estándar, utilizando un potenciómetro o papeles indicadores de pH, debiendo estar dentro de un rango adecuado para el antígeno que se prueba.
 
Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.