PRINCIPIOS GENERALES
• La leishmaniasis es una enfermedad parasitaria endémica en los valles interandinos y el llano amazónico de nuestro país. Es transmitida por picaduras de flebotominos.
• El agente causal es un protozoario parasito del género Leishmania, del cual se han reportado 5 especies en el Perú: L. braziliensis, L. peruviana, L. guyanensis, L. amazonensis y L. lainsoni. Siendo las dos primeras las responsables de la mayoría de los casos de leishmaniasis.
• Para el diagnóstico de leishmaniasis se requiere de muestras de linfa, frotis de tejido, exudado y biopsias.
• Las biopsias deben ser realizadas por el médico o un personal de salud  capacitado.
 
MUESTRA DE CUERPOS FLUIDOS (LINFA)
MATERIALES 
- Una jeringa de tuberculina estéril (1 cc).
- Algodón.
- Alcohol al 70%. ·
- Agua oxigenada. .
- Suero fisiológico estéril.
- Tubos con medio de cultivo agar sangre o NNN.
 
METODO DE OBTENCIÓN
1. Lavar la lesión ulcerada (área necrótica, muerta) con agua y jabón.
2. Elegir el área decolorada de la pápula (pequeño nódulo) que se halla al
margen de la úlcera. Desinfectarla con alcohol al 70% y agua oxigenada. 
3. Cargar la jeringa de tuberculina con 0,2 cc de solucion salina estéril.
4. Por punción inyectar suavemente dentro del área elegida y enseguida aspirar el contenido inyectado.
5. Retirar la jeringa.
6. Con 2 ó 3 gotas del material aspirado, inocular en los tubos con medio de cultivo. 
 
MUESTRA DE FROTIS
MATERIALES
- Láminas portaobjetos limpias y desgrasadas.
- Un bisturí con hoja 20 ó 21 estéril.
- Algodón y gasa estéril.
- Alcohol al 70%.
 
MÉTODO DE OBTENCIÓN
1. Lavar la lesión ulcerada con agua y jabón.
2. Elegir el borde de la lesión ulcerada.
Desinfectar con alcohol al 70%.
3. Presionar con firmeza los bordes de la lesión hasta que palidezca; en el borde interno, hacer una pequeña incisión con la hoja del bisturí estéril  tratando de levantar la piel; secar la sangre con gasa y raspar el tejido.
4. Con el material obtenido en la hoja de bisturí, hacer el frotis en el portaobjetos, procurando que éste sea delgado y evitando pasar dos veces por el mismo sitio.
5. Rotular el portaobjetos y dejar secar al medio ambiente.
Atención: * El frotis también puede realizarse con material de biopsia.
 
MUESTRA DE TEJIDO (BIOPSIA)
MATERIALES
- Algodón y gasa.
- Alcohol al 70%.
- Agua oxigenada.
- Punch de biopsia de 2 - 4 mm, estéril.
- Bisturí con hoja 20 ó 21 estéril.
- Pinzas estériles punta roma.
- Xilocaína al 2%.
- Papel filtro.
- Viales.
- Solución salina estéril o formol.
 
MÉTODO DE OBTENCIÓN
1. Lavar la lesión ulcerada con agua y jabón.
2. Elegir el borde de la lesión ulcerada. Desinfectar con alcohol al 70% y agua oxigenada.
3. Anestesiar con 0,5 cc de xilocaína el área elegida.
4. Introducir el punch en el borde de la lesión y rotar varias veces con movimiento suave. 
5. Retirar el punch, y con ayuda de la pinza y la hoja de bisturí, cortar la base del tejido removido por el punch.
6. Presionar con gasa el área donde se ha retirado el tejido, hasta que deje de sangrar. Luego cubrir la herida.
7. Colocar la biopsia (el tejido cortado) sobre un papel filtro para absorber el exceso de sangre.
8. Introducir el tejido en un vial que contenga solución salina estéril o formol de acuerdo con lo indicado en el examen.
 
DIAGNÓSTICO DE LEISHMANIASIS TEGUMENTARIA
PRINCIPIOS GENERALES
• En nuestro país se han descrito como forma clínica, la leishmaniasis tegumentaria ya sea cutánea (uta) o cutánea-mucosa (espundia).
 
EXAMEN DIRECTO
• Se basa en la detección del parásito bajo su forma de amastigote, los cuales se encuentran dentro de los macrófagos.
• Los amastigotes tienen formas redondeadas y en el citoplasma se  nota el núcleo y el kinetoplasto.    
• La muestra se obtiene por frotis, de una punción - aspiración o una biopsia con la cual se puede realizar una impronta - frotis.
Este examen tiene una positividad que varia del 33 - 43%. A pesar de su baja positividad es de bajo costo y fácil de aplicar en sitios que cuentan como mínimo con un microscopio.
 
CULTIVO
• Se basa en la recuperación del parásito bajo su forma de promastigote.
• La muestra se obtiene de una punción - aspiración o una biopsia.
 
Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.