Gota Gruesa y Frotis

•En climas húmedos y cálidos, las muestras se fijan muy rapidamente, por lo tanto, deben ser coloreadas con solución Giemsa cuanto antes, a más tardar en un plazo de 3 días después de obtenida la muestra, a fin de evitar la fijación y contaminación por hongos.

• Las láminas con muestras de sangre no deben exponerse a la luz solar fuerte o estar cerca a fuentes de calor.

• Las láminas con muestras de sangre deben protegerse de moscas, cucarachas y hormigas. Estas comen la sangre seca y dañan la muestra.

• Para cumplir con las medidas de bioseguridad y evitar posibles contagios, las muestras de sangre serán procesadas como material altamente infeccioso.

• Para la conservación y el envío de muestras, las laminas deben ser envueltas y rotuladas individualmente, con sus respectivas fichas. Luego se introducirán en una caja de cartón rotulada para enviarse al laboratorio del centro de salud.

• Para el control de calidad se enviarán las muestras al centro de salud de referencia.

 

LAMINAS TEÑIDAS

• En todas las etapas de desarrollo las diversas partes del parásito se tiñen del mismo color.

• La cromatina (núcleo del parásito) es generalmente redonda y se colorea de un rojo intenso.

• El citoplasma del parásito toma diferentes formas, desde una forma de anillo a una totalmente irregular. Se colorea siempre de azul, aunque la tonalidad puede variar entre las especies de Plasmodium.

 

  

• Para fines de aprendizaje de las especies de Plasmodium, etapas de desarrollo, etc.; es mejor iniciarse en la lectura del frotis.

1. Una manera de distinguir entre las cuatro especies de malaria es ver el efecto que tiene el parásito dentro de los glóbulos rojos infectados:

- El tamaño del glóbulo rojo.

- Su forma, su color.  

- Los granulos de Schuffner se pueden ver como un moteado en los glóbulos rojos.

- El pigmento malárico.

2. El examen de frotis de sangre no es recomendable rutinariamente, ya que requiere mayor tiempo de observación en comparación con la gota gruesa.

3. El examen de frotis es recomendado en los siguientes casos:

- Cuando no es posible examinar la gota gruesa por ser muy pequeña.

- Cuando es necesaria la identificación de la especie.

 

• El examen de la gota gruesa es mejor para detectar la presencia de parásitos.

• Rutinariamente, la gota gruesa debe ser examinada primero. Presenta las siguientes caracteristicas:

- Los globulos rojos han desaparecido.

- Los granulos de Schuffner se pueden observar alrededor del parásito.

- Los leucocitos se conservan sin modificaciones. Los parásitos pueden ser vistos semejantes a los leucocitos, pero tienen apariencia más pequeña que en el frotis.

- El citoplasma de los anillos finos de los trofozoítos puede aparecer incompleto o roto en las preparaciones de gota gruesa.

- Las granulaciones de Maurer de Plasmodium falciparum no pueden ser vistos en gota gruesa.

 

a. Técnica para el examen de gota gruesa

• El examen de rutina de gota gruesa está basado en el examen de 100 campos. 

• Se reporta lámina negativa sólo después de no haber encontrado parásitos en 100 campos de la muestra de sangre. Si son encontrados parásitos debe finalizarse el examen con la identificación de especie.

1. Colocar la lámina entre los soportes de la platina mecánica del microscopio.

Examinar la muestra con el objetivo de 7x ó 10x hasta localizar una zona en que los leucocitos sean numerosos y aparezcan bien coloreados.

2. Colocar aceite de inmersión sobre la zona localizada de la gota gruesa y cambiar el objetivo a 100x.

3. Examinar 100 campos. Desplazar la muestra de sangre siguiendo el patrón, comenzando por la parte inferior de la lámina hacia la izquierda de allí a la parte superior, luego hacia la derecha de allí de nuevo a la parte superior, después hacia la izquierda . Luego recorremos este desplazamiento por toda la lámina.

4. Usar un contador manual para contar los campos que van a ser examinados y para el recuento de parásitos.

5. Al encontrar el parásito anotar sus características de color, aspecto, etc.

 

Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.