Preparación de los principales medios de cultivo
• Se debe asegurar el máximo porcentaje de sustancias nutritivas de crecimiento.
• Debe adaptarse la reacción final del medio de cultivo, a un pH óptimo para los microorganismos que se van a cultivar, con errores no mayores de 0.1 de la unidad del pH requerido.
• No debe olvidarse que una filtración exagerada del medio puede eliminar las sustancias nutritivas.
• La esterilización debe tener un control minucioso de la temperatura y tiempo de duración. La prolongación indebida en el tiempo de esterilización destruye las sustancias nutritivas y se produce una reducción del volumen de los medios.
• Debe usarse durante la preparación de los medios solo recipientes de cristal de preferencia Pyrex o similares.
• La repartición de los medios de cultivo se realiza siempre cerca del mechero de Bunsen (o de alcohol), en tubos o placas Petri. En los tubos se debe formar un plano inclinado y en las placas se debe tener una distribución homogénea.
• Los medios de cultivo contenidos en tubos se conservan mejor en refrigeración, ya que se disminuye la evaporación.
• Se tiene medios inclinados en tubo y medios en placa Petri:
- Medios inclinados en tubo, se emplea principalmente para resembrar cepas aisladas previamente, con la finalidad de identiticarlas.
- Medios en placa Petri, se emplea principalmente para permitir el crecimiento de colonias individualmente aisladas. Las placas se colocan en la estufa con la base hacia arriba.
• Debe seguirse al pie de la letra las instrucciones escritas en relación con la preparación de medios de cultivo, debiendo usarse exclusivamente, productos quimicamente puros, a no ser que se indique lo contrario.
• En casas comerciales los medios se adquieren en forma deshidratada. Se debe registrar en el recipiente del medio deshidratado la fecha de recepción y de apertura. Entre uso y uso, se debe almacenar como se indica en la etiqueta, con escasa luz, baja humedad ambiental, y con el recipiente fuertemente tapado.
• Antes de empezar a usar un nuevo lote de medios de cultivo, realizar un control de calidad del medio.
Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.
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