FUNDAMENTO
La presencia de las sales biliares y el cristal violeta inhiben el crecimiento de las bacterias Gram positivas. La lactosa presente y el indicador rojo neutro permiten diferenciar los gérmenes fermentadores de éste azúcar de aquellos que no lo hacen.
 
COMPOSICIÓN
Peptona de caseína       17.0g
Lactosa                       10.0g
Peptona de carne           3.0g
Sales biliares                 1.5g
Cloruro de sodio            5.0g
Rojo neutro                 0.03g
Cristal violeta              0.001g
Agar agar                     12.5g
Agua destilada         1000.0ml
 
PREPARACIÓN
Disolver los ingredientes en baño maría, ajustar el Ph 7.0. Autoclavar 15 minutos a 121°C. Repartir en placas Petri 20ml/placa.
 
PROCEDIMIENTO
Sembrar de acuerdo a lo descrito, dejar incubar por 24 horas a 37°C.
 
INTERPRETACIÓN
Las bacterias Gram positivas son inhibidas con excepción de los Enterococos que crecen dando colonias pequeñas translúcidas y ligeramente rosadas. El grupo de los Gram negativos dan colonias de acuerdo con el comportamiento de las bacterias frente al disacárido lactosa, es así que los lactosa positivo dan coloraciones rojizas, la bacteria degrada la lactosa y produce ácido virando el indicador del medio( rojo neutro) a un color rojizo.
 
Escherichia coli da colonias rojizas con un precipitados de ácidos biliares.
 
El género Enterobacter da colonias rojas, grandes con menor cantidad de precipitado.
 
Las Klebsiellas dan colonias rosadas mucosas, grandes, acidificando el medio, pasado las 48 horas se produce una reversión del Ph hacia la alcalinidad por sobre producción de metabolitos de los polisacáridos capsulares extracelulares tornándose las colonias a un color amarillento.
 
Las bacterias lactosa negativas dan colonias incoloras o un crema blanco sin mayor alteración del medio, cuando el cultivo sobrepasa las 48 horas se acentúa la alcalinización del medio tornándose éste a un color amarillento. Los gérmenes Salmonella, Proteus, Providencia, Edwarsiella, Arizona, Citrobacter, etc son lactosa negativos. 
 
Los Proteus producen un olor fuerte y fétido muy característico. Las Pseudomonas aeruginosa en este medio dan colonias ligeramente rosadas al principio, pero luego de 24 – 43 horas se tornan grisáceas por la aparición de los pigmentos piocianina y fluorescina (de un color que va del verde al azulado), también se le puede distinguir por su olor característico a mariscos.
 
Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.
Tags: ,

Identificación Bacterias

: 7 + 9 =