Urea de Crhistensen
FUNDAMENTO
Detecta la presencia de la enzima ureasa. Cuando la bacteria tiene la enzima, la urea es desdoblada a amonio y CO2. El amonio alcaliniza el medio haciendo virar el indicador al rosado intenso.
COMPOSICIÓN
Nutriente: Peptona
Sustratos: Urea
Amortiguadores: Cloruro de sodio, fosfato de potasio monobásico
Indicador de pH: Rojo fenol
Temperatura de incubación: 35-37°C
Tiempo de incubación: 18-24 horas. Máximo 4 días
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO TERMINAL
Urea » ureasa » NH4 (Amonio)
PREPARACIÓN
Preparar de acuerdo con las indicaciones del fabricante.
Autoclavar 121 °C, 15 libras / pulg2 por 15 minutos. Enfriar hasta 50 °C.
Asépticamente agregar al agar 100 mL de urea estéril.
Distribuir el medio asépticamente en tubos estériles, aproximadamente 4 mL por tubo.
Solidificar en posición inclinada formando un pico de flauta largo, con la capa profunda reducida.
Conservar en refrigeración (4 – 10 °C)
• Urea:
Pesar 20 g en 100 mL de agua destilada o desmineralizada.
No calentar la solución. Esteriizar por filtración (utilizar filtro de membrana Millipore, diámetr del poro 0,45 mm).
De no contar con los filtros se puede esterilizar la urea por tindalización.
TÉCNICA DE INOCULACIÓN
Rotular el tubo que contiene el medio de cultivo.
Con un asa recta, tomar un inóculo del agar nutritivo o TSA.
Estriar la superficie del agar desde el fondo a la parte superior con un movimiento en forma de S, a medida que retira el asa del tubo.
Incubar el tubo.
Leer la reacción bioquímica del medio.
Fuente: Manual de Procedimientos Bacteriológicos en Infecciones Intrahospitalarias. MINSA-INS. 2005. Manual de Procedimientos de Bacteriología Médica del CNDR/MINSA edición 2004
ureasa, urea, medios diferenciales
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