Medio LMP Agar Base

FUNDAMENTOS

Medio selectivo para aislamiento de listeria. Las vitaminas y minerales, peptonas y extracto de carne proporcionan nitrógeno, el cloruro de sodio mantiene el equilibrio del medio. La glicina se utiliza para mejorar la recuperación de Listeria spp.. El cloruro de litio y feniletanol se incorporan para la inhibición de contaminantes. El suplemento selectivo Listeria se añade luego de la esterilización para inhibir estafilococos, bacilos y especies de Proteus.

COMPOSICIÓN
Digerido de caseína pancreática................... 5 g
Proteosa peptona Nº 3 ................................... 5 g
Extracto de carne ........................................... 3 g
Cloruro de sodio ............................................. 5 g
Cloruro de litio ................................................. 5 g
Glicina anhídrido.............................................10 g
Feniletanol ......................................................2.5 g
Agar..................................................................15 g
Agua destilada......................................... 1000 ml
pH 7.3 a 25 ºC

Suplemento selectivo (Vial por 1 ml)
Moxalactam ..................................................0.01g
Preparación: Reconstituir cada vial liofilizado agregando estérilmente 2 ml de agua destilada estéril. Invertir varias veces el vial para homogeneizar la solución.

PREPARACIÓN

Suspender 50.5 g del medio deshidratado en agua destilada y calentar hasta disolución. Esterilizar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 50 ºC y agregar estérilmente el suplemento. Distribuir en placas de Petri y solidificar.
Características del medio: Medio deshidratado homogéneo y claro. En solución medio color ámbar ligeramente opalescente. Suplemento liofilizado blanco o amarillento, seco. En solución limpio, amarillo pálido.

REALIZACIÓN DE LA PRUEBA

Inocular e incubar las placas a 35 - 37 ºC durante 18 – 48 horas.

LECTURA E INTERPRETACIÓN

Observar las colonias bajo luz de transmisión oblicua. Colonias características de Listeria muestran un color gris a azul con una base de apariencia cristalina.

CONTROL DE CALIDAD

Listeria monocytogenes ATCC 19114: Buen desarrollo
Bacillus subtilis ATCC 6633: Inhibición parcial
Enterococcus faecalis ATCC 29212: Inhibición completa
Escherichia coli ATCC 25922: Inhibición completa
Staphylococcus aureus ATCC 25923: Inhibición completa

Fuente: Servicio Bacteriología Especial Departamento de Bacteriología Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas A.N.L.I.S. “Dr. Carlos G. Malbrán” (2008). Manual de Procedimientos Aislamiento, identificación y caracterización de Listeria monocytogenes. Buenos Aires: Callejo, R. , Prieto, M. , Martínez, C. , Aguerre, L. , Rocca, F. y Martínez G.