Prueba de aglutinación rápida en placa

• Es una prueba de diagnóstico rápida, muy usada, sin embargo los resultados  pueden variar cuando los antígenos empleados son de mala calidad o la técnica no es la correcta.

• Se utiliza el antígeno preparado con Brucella abortus. 

• Con esta prueba se detecta la presencia tanto de Inmunoglobulina IgM como de la IgG.

• Se debe considerar como título presuntivamente positivo 1/ 100, o positivo cuando aumenta el título por lo memos el cuádruplo del valor inicial  en una muestra examinada con por lo menos 1 semana de diferencia.

 

1. Con la pipeta inclinada a 45° en contacto con la placa, depositar:

- 0,08 ml    0,04 ml    0,02 ml    0,01 ml  0,005 ml

de la muestra de suero en una columna de la placa.

2. Agitar suavemente el antígeno y con el gotero en posición vertical dejar caer una gota del antígeno sobre cada una de las muestras del suero.

3. Con un agitador o un palito de dientes, mezclar cuidadosamente el suero y el antígeno con un movimiento circular, empezando por la dilución más alta. La mancha circular ocupada por cada dilución debe tener los siguientes diámetros:

0,08 = 27 mm.   0,04 = 24 mm.    0,02 = 21 mm.

0,01 = 18 mm.   0,005 = 15 mm.

Si se trata de suero de un mismo paciente, no es necesario enjuagar y secar los agitadores cuando se agita de altas a bajas diluciones.

Cambiar de agitador cuando se trata de sueros de diferentes pacientes.

4. Levantar la placa y agitar con un suave movimiento rotatorio (4 veces).

5. Colocar la placa en el aglutinoscopio, se apaga la luz oscureciendo la habitación y se cierra la tapa para evitar la evaporación, y se espera 8 minutos.

6. Al término de los 8 minutos se levanta la tapa, se prenden las luces del aglutinoscopio, se rota nuevamente la placa por 4 veces y hacer la lectura inmediatamente.

 

1.La lectura debe hacerse exactamente a los 8 minutos, que es cuando las muestras alcanzan la aglutinación máxima, si se prolonga el tiempo favorece la evaporación excesiva que da apariencia de aglutinación en la periferia de la mezcla suero-antígeno.

REACCIÓN COMPLETA

• La mezcla suero-antígeno ha sido aglutinada y el líquido que las rodea es completamente transparente. El tamaño de la masa aglutinada varia de fino a grandes grumos.

REACCIÓN INCOMPLETA

• Incluye todos los grados intermedios de reacción que van de trazas de partículas aglutinadas y el líquido que las rodea no es transparente. En tal caso, si el porcentaje de aglutinación es mayor del 50%, se informa como reacción completa en este título y si es menor del 50% se informa como negativa.

REACCIÓN NEGATIVA

• Es una mezcla homogénea de suero-antígeno sin ninguna evidencia de aglutinación.

TÍTUL0 DEL SUERO

Suero (ml)       Título         Suero (ml)         Título

0,08                  1/25           0,01                    1/200

0,04                  1/50           0,005                  1/400

0,02                  1/100

 

Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.