Prueba de aglutinación rápida en placa
• Es una prueba de diagnóstico rápida, muy usada, sin embargo los resultados pueden variar cuando los antígenos empleados son de mala calidad o la técnica no es la correcta.
• Se utiliza el antígeno preparado con Brucella abortus.
• Con esta prueba se detecta la presencia tanto de Inmunoglobulina IgM como de la IgG.
• Se debe considerar como título presuntivamente positivo 1/ 100, o positivo cuando aumenta el título por lo memos el cuádruplo del valor inicial en una muestra examinada con por lo menos 1 semana de diferencia.
METODO
1. Con la pipeta inclinada a 45° en contacto con la placa, depositar:
- 0,08 ml 0,04 ml 0,02 ml 0,01 ml 0,005 ml
de la muestra de suero en una columna de la placa.
2. Agitar suavemente el antígeno y con el gotero en posición vertical dejar caer una gota del antígeno sobre cada una de las muestras del suero.
3. Con un agitador o un palito de dientes, mezclar cuidadosamente el suero y el antígeno con un movimiento circular, empezando por la dilución más alta. La mancha circular ocupada por cada dilución debe tener los siguientes diámetros:
0,08 = 27 mm. 0,04 = 24 mm. 0,02 = 21 mm.
0,01 = 18 mm. 0,005 = 15 mm.
Si se trata de suero de un mismo paciente, no es necesario enjuagar y secar los agitadores cuando se agita de altas a bajas diluciones.
Cambiar de agitador cuando se trata de sueros de diferentes pacientes.
4. Levantar la placa y agitar con un suave movimiento rotatorio (4 veces).
5. Colocar la placa en el aglutinoscopio, se apaga la luz oscureciendo la habitación y se cierra la tapa para evitar la evaporación, y se espera 8 minutos.
6. Al término de los 8 minutos se levanta la tapa, se prenden las luces del aglutinoscopio, se rota nuevamente la placa por 4 veces y hacer la lectura inmediatamente.
LECTURA
1.La lectura debe hacerse exactamente a los 8 minutos, que es cuando las muestras alcanzan la aglutinación máxima, si se prolonga el tiempo favorece la evaporación excesiva que da apariencia de aglutinación en la periferia de la mezcla suero-antígeno.
REACCIÓN COMPLETA
• La mezcla suero-antígeno ha sido aglutinada y el líquido que las rodea es completamente transparente. El tamaño de la masa aglutinada varia de fino a grandes grumos.
REACCIÓN INCOMPLETA
• Incluye todos los grados intermedios de reacción que van de trazas de partículas aglutinadas y el líquido que las rodea no es transparente. En tal caso, si el porcentaje de aglutinación es mayor del 50%, se informa como reacción completa en este título y si es menor del 50% se informa como negativa.
REACCIÓN NEGATIVA
• Es una mezcla homogénea de suero-antígeno sin ninguna evidencia de aglutinación.
TÍTUL0 DEL SUERO
Suero (ml) Título Suero (ml) Título
0,08 1/25 0,01 1/200
0,04 1/50 0,005 1/400
0,02 1/100
Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.
brucelosis, aglutinación, placa
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