Hepatitis B
PRINCIPIOS GENERALES
TEST DE LÁTEX DIRECTO PARA LA DETECCIÓN DEL ANTÍGENO DE SUPERFICIE DE LA HEPATITIS B (HBsAg)
• Se basa en una reacción de aglutinación de látex.
• Las partículas de látex están sensibilizadas con anticuerpos monoclonales reactivos frente al antígeno de superficie de la hepatitis B (HBsAg).
• En el caso de una reacción positiva pueden obtenerse distintos patrones de aglutinación. En ausencia del antígeno HBsAg no se produce la aglutinación.
• Los procedimientos del fabricante son incluidos en los paquetes (kits), y es especialmente importante que éstos se entiendan y que todo el equipo, material y condiciones ambientales estén disponibles para la realización de la prueba.
• Todos los juegos de las pruebas incluyen controles positivos y negativos que deben ser procesados durante cada examen para asegurar la validez de los resultados de la prueba.
Atención:
* Los componentes del kit, mantenidos a 2 - 8°C, son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. No se debe congelar.
MÉTODO
• Las partículas de látex están sensibilizadas con gamma-globulinas de conejo.
MATERIALES
- Reactivo de látex: 1 x 2,5 ml.
- Control positivo: 1 x 0,5 ml. Prediluido.
- Control negativo: 1 x 0,5 ml. Prediluido.
- Placas de reacción.
- Agitadores desechables.
PROCEDIMIENTO
1. Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente.
2. Homogenizar completamente el reactivo de látex.
3. Diluir la muestra que se examinará, 1/40 en salina (0,9% NaCl), 1 gota (50 ul) de suero fresco más 2 ml de salina (0,9% de cloruro de sodio).
4. Colocar una gota de la muestra diluida en uno de los círculos de reacción.
5. Colocar una gota de la muestra sin diluir en otro de los círculos.
6. Colocar una gota de cada uno de los controles en los correspondientes círculos de reacción.
7. Añadir una gota de reactivo de látex homogenizado a cada uno de los círculos.
8. Mezclar con distintos agitadores, cada uno de los círculos, de modo que el líquido se extienda por toda la superficie.
9. Balancear la placa y observar la presencia de aglutinación a los 5 minutos.
LECTURA
• De acuerdo con los siguientes patrones de aglutinación:
- HBsAg negativo
No hay aglutinación ni en la muestra diluida ni en la muestra sin diluir.
- HBsAg positivo (Nivel medio elevado)
Aglutinación en las muestras diluidas y sin diluir.
- HBsAg positivo (Nivel bajo)
Aglutinación en la muestra sin diluir.
No aglutinación en Ia muestra diluida.
- HBsAg positivo (Nivel alto)
Aglutinación en la muestra diluida
No aglutinación en la muestra sin diluir (por fenómeno de zona).
Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.
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