Reactivos tinción ziehl y neelsen

COMPOSICIÓN
FENOL ACUOSO
- Fenol cristalizado                        100 g.
- Agua destilada                           10 ml.
 
FUCSINA FENICADA
- Fucsina básica                               3 g.
- Alcohol de 95 °                         100 ml.
- Fenol acuoso                              55 ml.
- Agua destilada c.s.p.              1 000 ml.
 
AZUL DE METILENO
- Azul de metileno                            1 g.
- Alcohol de 95 °                         100 ml.
- Agua destilada c.s.p.              1 000 ml.
 
SOLUCIÓN DECOLORANTE
- Ácido clorhídrico                         30 ml.
- Alcohol de 95 °                         970 ml.
 
PREPARACIÓN
FENOL ACUOSO
1. Agregar al fenol cristalizado el agua destilada. Calentar en baño maría hasta la completa disolución y enfriar.
• El fenol acuoso se mantiene líquido.
 
FUCSINA FENICADA
1. Disolver por agitación la fucsina básica en alcohol de 95°. Agregar el fenol acuoso, agitar y agregar agua destilada hasta completar 1 litro.
2. Dejar reposar por 24 horas y luego filtrar.
 
AZUL DE METILENO
1. Disolver por agitación el azul de metileno con el alcohol de 95 °. Agregar agua destilada hasta completar 1 litro.
2. Dejar reposar por 24 horas. Filtrar antes de usar.
 
SOLUCIÓN DECOLORANTE
Con la pipeta dejar escurrir el ácido clorhídrico por las paredes del matraz, que contiene el alcohol, agitar suavemente hasta completar la mezcla.
• Los reactivos deben conservarse en un frasco de color ámbar.
• Se recomienda preparar los colorantes para un consumo no mayor de un mes.
• Todos los reactivos deben filtrarse cada vez que sean transferidos a los
pequeños frascos cuentagotas que se emplean para la tinción. Esto es especialmente necesario para la fucsina fenicada.
 
Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.

ziehl-neelsen, tinción

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