FUNDAMENTO

Medio selectivo y diferencial debido a que Listeria spp. hidroliza esculina que en presencia de iones férricos forma un compuesto fenólico de color negro. Es selectivo para Listeria spp., por el agregado del suplemento selectivo para agar base Palcam que contiene antibióticos que inhiben en forma total o parcial el desarrollo de la flora presente en la muestra y permiten la recuperación de Listeria spp.

COMPOSICIÓN

Agar base
Agar base Columbia................................................ 39 g
D(-) manitol.............................................................. 10 g
Citrato férrico de amonio ........................................ 0.5 g
Esculina ..................................................................0.8 g
D(+) glucosa ...........................................................0.5 g
Cloruro de litio ......................................................... 15 g
Rojo de fenol .........................................................0.08 g
Agua destilada..................................................... 1000 ml

Suplemento (para 500 ml de medio)
Agar base Columbia................................................ 39 g
Esculina ......................................................................1 g
Citrato férrico de amonio .........................................0.5 g
Sulfato de polimixina B...............................................5 mg
Ceftazidima..............................................................10 mg
Acriflavina............................................................... 2.5 mg
Agua destilada........................................................ 2.5 ml

PREPARACIÓN

Suspender los ingredientes en agua destilada y calentar hasta disolución. Esterilizar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 50 ºC y agregar estérilmente el suplemento. Ajustar pH ± 7.2. Distribuir en placas de Petri (15 ml aproximadamente).

REALIZACIÓN DE LA PRUEBA

Inocular e incubar las placas a 35 - 37 ºC durante 18 – 48 horas.

LECTURA E INTERPRETACIÓN

Las colonias típicas de Listeria spp. se observan como verde grisáceas, rodeadas de halo negro y pueden mostrar centro oscuro. A las 48 horas puede observarse colonias con centro deprimido.

CONTROL DE CALIDAD

Controlar la esterilidad del medio:
Listeria monocytogenes ATCC 19112: Muy buen desarrollo. Colonias grises a verdosas con centro y halo negro.
Staphylococcus aureus ATCC 25923: Desarrollo positivo. Colonias amarillas con halo amarillo.
Enterococcus faecalis ATCC 29212: Desarrollo positivo. Colonias grises con halo marrón verdoso.

Fuente: Servicio Bacteriología Especial Departamento de Bacteriología Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas A.N.L.I.S. “Dr. Carlos G. Malbrán” (2008). Manual de Procedimientos Aislamiento, identificación y caracterización de Listeria monocytogenes. Buenos Aires: Callejo, R. , Prieto, M. , Martínez, C. , Aguerre, L. , Rocca, F. y Martínez G.