• Se encuentra en el comercio antígenos de O y H de Salmonella para realizar la prueba. Este método es rápido y exacto.
• Es preciso agitar bien el vial de antígeno, antes de usarlo, para garantizar una suspensión uniforme y lisa. No deben congelarse.
• Almacenar los viales con antígeno a 2 - 8°C.
MATERIALES
-Antígeno de Salmonella typhi H y O.
-Materiales para obtención de suero del paciente.
- Pipetas serológicas de 0,2 ml.
- Placa de vidrio grande (20 x 20 cm) dividida con lápiz de cera y regla en cuadrados (2,5 - 1,27 cm) de preferencia, 5 hileras de 6 cuadrados.
- Un aplicador o un paljto de dientes.
MÉTODO
1. Depositar en los cuadrados de cada hilera o en cada lámina, las siguientes medidas del suero del paciente: 0,08, 0,04, 0,02, 0,01 y 0,005 ml.
2. Añadir a cada medida del suero 0,03 ml de suspensión de antígeno.
3. Mezclar cada compuesto antígeno-suero con un aplicador o un palito de dientes, comenzar con la dilución de suero de 0,005 ml y continuar hasta la dilución de 0,08 ml.
4. Rotar (oscilar) la placa de vidrio suavemente 15 - 20 veces (durante 2 minutos).
Proceder a la lectura inmediatamente.
LECTURA E INFORME
1. Observar la presencia de grumos, indicativo de aglutinación.
2. Los grados de aglutinación se interpretan con la siguiente escala:
4+ Aglutinación completa
3+ El 75% de las partículas, están aglutinadas
2+ El 50% de las partículas, está aglutinadas
1+ El 25% de las partículas, está aglutinadas
Negativo Ninguna aglutinación
3. Las diluciones de suero sobre la placa corresponden a las siguientes diluciones en tubo (aglutinación en tubo):
- 0,08 ml de suero 1/20
- 0,04 ml de suero 1/40
- 0,02 ml de suero 1/80
- 0,01 ml de suero 1/ 160
- 0,005 ml de suero 1/320
4. Título del suero
El titulo del suero que se informa corresponde a la última dilución del suero en que se produce una aglutinación de por lo menos 2+ (50%).
5. Ejemplo de cálculos
Placa1 Placa2 Placa3 Placa4 Placa5 Resultado
Dilución Dilución Dilución Dilución Dilución
0,08 ml 0,04 ml 0,02 ml 0,01 ml 0,005 ml
2+ 1+ - - - Posit. 1/20
3+ 2+ 1+ - - Posit. 1/40
4+ 3+ 2+ 1+ - Posit. 1/80
4+ 4+ 3+ 2+ 1+ Posit.1/160
4+ 4+ 4+ 3+ 2+ Posit.1/320
Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.