PRINCIPIOS GENERALES
• Antes de preparar una concentración de parásitos se debe realizar un exámen microscópico directo de las heces.
• El método de concentración hace posible que se detecten parásitos que están presentes en escaso número.
• Este método se basa en el peso específico de los quistes o huevos.
• En este método de concentración de parásitos no se encuentran formas móviles de protozoarios.
• En el método de concentración, cuando se usa soluciones de baja densidad, los huevos o quistes sedimentan y cuando se usa soluciones de alta densidad, los huevos o quistes flotan.
MÉTODO DE FLOTACIÓN DE FAUST
• Es una técnica mixta de centrifugación y flotación que concentra quistes y huevos con la solución de sulfato de zinc.
• El método permite concentrar los quistes, los huevecillos y las larvas.
MATERIALES
- Tubos de ensayo de 13 X 100 mm.
- Portaobjetos.
- Cubreobjetos.
- Sulfato de zinc al 33,3%
- Lugol.
- Agua corriente tibia.
- Aplicador de madera.
- Una centrífuga.
- Un microscopio.
MÉTODO
1. En el tubo de ensayo mezclar, usando el aplicador de madera, 2 g de heces con 8 - 10 ml de agua corriente tibia, centrifugar a 3 000 RPM durante 3 minutos.
2. El líquido sobrenadante obtenido en el tubo centrifugado, se elimina. Añadir 2 - 3 ml de agua y volver a centrifugar según el procedimiento anterior. Repetir 3 - 4 veces esta operación hasta obtener un líquido sobrenadante claro.
3. Se añaden 3 - 4 ml de solución de zinc al 33,3%, se centrifuga durante 2 - 5minutos a 3000RPM. ·
4. Colocar el tubo centrifugado en una gradilla, llenándolo con el sulfato de zinc hasta el borde del tubo y colocar encima un cubreobjetos, dejar en reposo por 15 minutos.
5. Después de los 15 minutos, sacar el cubreobjetos, levantándolo. Colocarlo
en un portaobjetos con una gota de Lugol y observarlo al microscopio con objetivos de 10x y 40x.
MÉTODO DE SEDIMENTACIÓN DE RITCHIE
MATERIALES
- Tubos de ensayo de 13 x 100 mm.
- Portaobjetos.
- Cubreobjetos.
- Formol al 10%
- Éter sulfúrico comercial.
- Lugol.
- Agua corriente tibia.
- Un aplicador de madera.
- Bagueta.
- Una centrifuga.
- Un microscopio.
MÉTODO
1. Lavar las heces en igual forma que en la técnica de Faust.
2. Después del último lavado, llenar hasta la mitad el tubo centrifugado, con formol al 10% y 2 ml de éter.
3. Tapar con un tapón de jebe y sacudir vigorosamente, teniendo cuidado que el tapón no salte.
4. Retirar el tapón y centrifugar a 3 000 RPM por 3 minutos.
5. Se observará que en el tubo quedan 4 capas que son, de arriba hacia abajo: el éter con las grasas disueltas, una capa de detritus, el formol y el sedimento.
6. Desprender el tapón de detritus de las paredes del tubo, usando una bagueta y eliminar el resto de las capas, quedando en el tubo, unicamente el sedimento.
7. Diluir el sedimento con el líquido sobrante que escurre por las paredes del tubo, agitándolo.
8. Poner una gota en un portaobjeto con una gota de lugol. Colocar encima un cubreobjetos y observar en el microscopio con objetivos de 10x y 40x.
Fuente: Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud. INS. Perú.