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Agar Sulfito de Bismuto
FUNDAMENTO
Medio altamente selectivo que se recomienda para el aislamiento de Salmonella typhi y paratyphi. Su selectividad se manifiesta debido a la presencia del verde brillante, citrato de bismuto y sulfito de sodio.
La Salmonella typhi ataca a la glucosa con rapidez, permite la reducción del sulfito de sodio quien al combinarse con el bismuto, en presencia de verde brillante, suprimen el crecvimiento de los coliformes. El color negro que presentan las colonias de Salmonellas es debido a la formación de sulfuros de bismuto y de hierro. Los fafatos presentes sirven como tampón para regular la acidificación del medio por fermentación de la glucosa.
Las colonias de gérmenes reductores presentan elevada presión de electrones en su interior, disminuyendo hacia afuera. Por consiguiente en el centro de las mismas se reduce el sulfato hasta sulfuro. En los alrededores solamente se produce una reducción de bismuto a bismuto metálico, dando lugar a la aparición de un brillo metálico alrrededor de las colonias.
COMPOSICIÓN
Extracto de carne 5.0g
Peptona 10.0g
D (-) glucosa 5.0g
Sulfato de hierro 0.3g
Fosfato disódico 4.0g
Verde brillante 0.025g
Indicador de bismuto sulfito 8.0g
Agar-agar 15.0g
Agua destilada 1000ml
PREPARACIÓN
Se disuelven los medios en agua fría y luego se hierve a baño maría por 30 min. agitando constantemente. Se enfría el medio hasta 50°C aproximadamente y se reparten en placas petri 20ml/placa. Controlar el ph 7.6. El medio enfriado presenta un color verde pálido, si presentase color pardusco se desecha. Duración del medio 4 a 5 días.
PROCEDIMIENTO
La siembra puede hacerse a partir del material directamente o de un medio de enriquecimiento, 4 a 5 gotas del material se extiende con una espátula sobre la superficie del medio seco.
INTERPRETACIÓN
Al término de 48 horas de incubación las colonias de Salmonella typhi presentan colonias negras, con borde claro "ojo de conejo" y "ojo de pez". Las colonias pequeñas de un color varía del verde al pardo, y algunas veces mucosas, corresponden a coliformes, Serratia, Proteus, etc.
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