FUNDAMENTOS
Caldo de enriquecimiento para el aislamiento Listeria monocytogenes.
COMPOSICIÓN Y PREPARACIÓN
Medio base
Caldo tripteína soja ....................................... 30 g
Extracto de levadura ....................................... 6 g
Agua destilada ................................................ 1000 ml
3.1.2 Preparación: Agregar los componentes deshidratados al agua destilada y calentar suavemente hasta su completa disolución. Ajustar pH ± 7,3. Esterilizar 15 minutos a 121 ºC.
Suplemento 1
Acriflavina HCl .............................................. 23 mg
Agua destilada...............................................10 ml
Preparación: Disolver acriflavina HCl en agua destilada. Esterilizar por filtración.
Suplemento 2
Acido nalidíxico (sal sódica) .......................... 46 mg
Solución de NaOH 0.05 M ........................... 10 ml
Preparación: Disolver el ácido nalidíxico en la solución de NaOH 0.05 M. Esterilizar por filtración.
Suplemento 3
Cicloheximida ............................................57.5 mg
Etanol 96% v/v ................................................. 4 ml
Agua destilada .................................................. 6 ml
Preparación: Disolver la cicloheximida en mezcla etanol / agua. Esterilizar por filtración.
Preparación del medio completo
La base y los suplementos deben ser guardados separadamente, protegidos de la luz y refrigerados entre 2 y 5 ºC. Para completar la preparación del medio, agregar a 225 ml del medio base: Suplemento 1 = 1 ml; Suplemento 2 = 2 ml; Suplemento 3 = 2 ml
Pueden fraccionarse múltiplos de 1 ml, 2 ml y 225 ml para el uso apropiado.
CONTROL DE CALIDAD
Controlar la esterilidad de las soluciones.
Control de desarrollo: Incubar 24-48 horas a 30-37°C
Positivo: Listeria monocytogenes ATCC 19111 / Listeria grayii ATCC19120
Negativo: Escherichia coli ATCC 25922 / Staphylococcus aureus ATCC 6538P