Caldo Base Fraser

FUNDAMENTOS

El caldo base Fraser con el agregado de suplementos es recomendado para el enriquecimiento, aislamiento y cultivo de Listeria monocytogenes a partir de alimentos y espécimenes ambientales. Proteosa peptona, hidrolizado enzimático de caseína,
extracto de carne, extracto de levadura son nutrientes esenciales para el desarrollo.
Cloruro de litio inhibe el desarrollo de enterococos. Todas las especies de Listeria hidrolizan esculina a esculitina que, junto con los iones férricos, forman un complejo marrón oscuro a negro. Citrato férrico amónico favorece el desarrollo de L. monocytogenes.

COMPOSICIÓN

Proteosa peptona .............................................5 g
Hidrolizado enzimático de caseína................ 5 g
Extracto de levadura ......................................... 5 g
Extracto de carne ............................................. 5 g
Cloruro de sodio .............................................20 g
Cloruro de litio ................................................... 3 g
Fosfato disódico ..............................................12 g
Fosfato monopotásico ..................................1.35 g
Esculina ...............................................................1 g
Citrato férrico amónico ...................................0.5 g
Agua destilada.............................................1000 ml
pH final 7.2 ± 0.2 a 25 ºC

PREPARACIÓN

Suspender 57.85 g de medio deshidratado en 990 ml de agua destilada. Calentar a ebullición hasta disolución completa. Esterilizar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 °C y agregar estérilmente el contenido de un vial Rehidratado de suplemento (F2674). El suplemento de enriquecimiento Fraser contiene 25 mg de clorhidrato de acriflavina y 4 mg de ácido nalidíxico. Mezclar y fraccionar convenientemente.
Mantener el medio preparado a 8 ºC protegido de la luz directa.
Nota: Cloruro de litio es nocivo. Evite contacto corporal e inhalación de vapores. En caso de contacto con la piel, lavar con agua inmediatamente.
Características: Medio deshidratado: homogéneo, color amarillo. Mantener en lugar seco de 2 a 25 ºC
Medio preparado: amarillo, con fina precipitación. Luego del agregado del suplemento, la solución es amarillo fluorescente con ligera precipitación.

CONTROL DE CALIDAD

Positivo: desarrollo positivo, esculina positiva (con ennegrecimiento) Listeria monocytogenes ATCC 19111
Negativo: desarrollo negativo, esculina negativa (sin ennegrecimiento) Enterococcus faecalis ATCC 29212; Escherichia coli ATCC 25922; Staphylococcus aureus ATCC 25923

Fuente: Servicio Bacteriología Especial Departamento de Bacteriología Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas A.N.L.I.S. “Dr. Carlos G. Malbrán” (2008). Manual de Procedimientos Aislamiento, identificación y caracterización de Listeria monocytogenes. Buenos Aires: Callejo, R. , Prieto, M. , Martínez, C. , Aguerre, L. , Rocca, F. y Martínez G.